HHV-6A w Syncytial Giant-Cell Hepatitis ad 5

Te serologiczne odkrycia, które sugerowały możliwe aktywne infekcje wirusowe, skłoniły nas do zbadania, czy HHV-6A był wirusem replikującym u naszego pacjenta z utajonym zakażeniem HHV-6B (Ryc. 1). Badania molekularne
Figura 3. Figura 3. Wykrywanie chromosomu HHV-6 i Y przez reakcję łańcuchową polimerazy swoistej dla startera (PCR). Panel A przedstawia wykrywanie PCR HHV-6 w leukocytach krwi obwodowej zarówno dawcy, jak i pacjenta w momencie przeszczepienia (T0) oraz w próbkach pobranych z biopsji wątroby pacjenta w dniach 18, 40 i 354 po operacji za pomocą primerów specyficznych dla wariant A (górny panel) i wariant B (dolny panel). Produkt PCR o oczekiwanej długości (113 bp) ze starterami specyficznymi dla wariantu A amplifikowano w DNA z leukocytów krwi obwodowej dawcy i próbek biopsji wątroby pacjenta zawierających syncytialne komórki olbrzymie, ale nie w DNA z krwi obwodowej pacjenta leukocytów w momencie przeszczepienia lub w próbce biopsyjnej wątroby pacjenta po ustąpieniu syncytialnego zapalenia wątroby typu olbrzymiokomórkowego (górny panel). Produkt PCR o tej samej długości, ale ze starterami specyficznymi dla wariantu B, był amplifikowany tylko w DNA biorcy w czasie przeszczepu (dolny panel). Próbki od osób z pozytywną kontrolą reprezentuje DNA ze szczepu GS HHV-6A (GS / A), pasażowanego w linii komórkowej HSB-2 i ze szczepu Z29 HHV-6B (Z29 / B), pasażowane w Linia komórkowa Molt3. MKIX oznacza Marker IX i kontrolę ujemną NC. Panel B pokazuje detekcję PCR HHV-6 w gigantycznych komórkach izolowanych z próbki biopsyjnej wątroby biorcy w dniu 18, z primerami specyficznymi dla wariantu A (górny panel) i wariantu B (dolny panel). Produkt PCR o oczekiwanej długości (113 bp) ze starterami specyficznymi dla wariantu A amplifikowano w 4 z 10 syncytialnych komórek olbrzymich (górny panel, ścieżki 1, 7, 8 i 10), podczas gdy żaden produkt PCR z wariantem-B Specyficzne startery wykryto w testowanej dowolnej komórce olbrzymiej (dolny panel). Panel C pokazuje wykrywanie PCR HHV-6 w prawidłowych hepatocytach z próbki biopsyjnej wątroby pacjenta w dniu 18, z primerami specyficznymi dla wariantu A (górny panel) i wariantu B (dolny panel). W żadnym z testowanych normalnych hepatocytów nie wykryto żadnego produktu PCR z żadnym wariantem A lub wariantem B. Panel D pokazuje podwójną detekcję PCR HHV-6 ze starterami swoistymi dla wariantu A i chromosomu Y DNA w reprezentatywnych hepatocytach komórek olbrzymich (górny panel, ścieżka 10) i normalnych hepatocytów (dolny panel) z próbki biopsyjnej wątroby pacjenta w dniu 18. Dwa zamplifikowane produkty o oczekiwanej długości 190 pz (DNA chromosomu Y) i 113 pz (wariant A HHV-6) wykryto jednocześnie w na 10 pojedynczych hepatocytów z komórkami olbrzymimi (górny panel, ścieżka 10). Wariant A HHV-6 wykryto tylko w trzech innych hepatocytach z pojedynczą komórką olbrzymią (górny panel, ścieżki 2, 7 i 8), a DNA chromosomu Y wykryto tylko w jednym z ośmiu pojedynczych prawidłowych hepatocytów (dolny panel; ).
Figura 4. Figura 4. Mikromanipulacja komórek olbrzymich syncytialnych i reakcja łańcuchowa reakcji polimerazy (PCR) z HHV-6A. Pojedynczy hepatocyt wyizolowano z próbki pobranej z biopsji wątroby od pacjenta (hematoksylina i eozyna), co pokazano przed izolacją hepatocytów (panel A, wskaźnik sondy pokazuje jako linię na obrazie) i po izolacji (panel B )
[hasła pokrewne: pracownia emg, reaktory chemiczne, rehabilitacja kregoslupa ]

Powiązane tematy z artykułem: pracownia emg reaktory chemiczne rehabilitacja kregoslupa